An analysis of joint patent applications in China’s biopharmaceutical sector from the perspective of industry-academia-research collaboration
-
摘要:
以近10年我国生物医药产业产学研共同申请专利为研究对象，旨在深入把握我国生物医药产业产学研共同申请专利合作现状，探寻现存的问题，并针对如何解决这些问题向政府及相关机构提出建议，推进产学研专利合作的发展。研究使用incoPat全球专利数据库获取所需专利数据，构建产学、产研和学研共同申请专利数据集。从合作类型、地理分布、申请主体情况、法律状态、技术分类等角度进行统计分析，并根据江苏省专利数据，绘制了合作网络进行深入研究。结果表明，我国生物医药产业产学研共同申请专利合作正处于稳定发展期，但产研共同申请专利合作发展相对较缓慢；共同申请专利的类型主要为产学共同申请专利；专利数量的地理分布不平衡，表现出“东多西少”的情况；A61P35/00（抗肿瘤药物）是开展产学研共同申请专利合作最多的技术领域，且合作涵盖对药物安全性、有效性和可及性等多维度的技术功效；部分产学研共同申请专利未能实现技术向产品的转进，共同申请专利带来的实际效益不足；合作网络中大量的合作为偶发性合作和单一合作，小微企业和普通院校等边缘节点尚未深入参与产学研合作等。政府及相关机构可以通过树立激励政策、畅通专利信息渠道、牵头带动跨区域合作等方式，对产学研共同申请专利加以引导。
Abstract:This study focuses on joint patent applications in China’s biopharmaceutical industry over the past decade, involving collaborations between industry, academia, and research institutions. The aim was to comprehensively understand the current status of these joint patent applications, identify existing problems, and propose recommendations to the government and relevant agencies on how to address these issues and promote the development of industry-academia-research patent collaborations. The study utilized the incoPat global patent database to obtain the necessary patent data and constructed a dataset of joint patents applied through industry-academia, industry-research, and academia-research collaborations. Statistical analyses were conducted from various perspectives, including types of collaborations, geographical distribution, applicant profiles, and legal status. Based on patent data from Jiangsu province, a collaborative network was constructed for further investigation. The results indicate that joint patent applications in China’s biopharmaceutical industry are in a phase of steady growth, with the majority of joint applications stemming from industry-academia collaboration. However, the joint application for patents between industry and research is relatively slow in development. There is a geographical imbalance in the distribution of patents, with more being concentrated in the east compared to the west. A61P35/00 (anti-tumor drug) is the most active field for industry-academia-research collaborative patent applications, with cooperation encompassing multi-dimensional improvements in the safety, efficacy, and accessibility of drugs. Portions of patents co-filed by industry, academia, and research institutions have failed to transition technology into products, resulting in insufficient practical benefits from the co-filed patents. Chinese research institutions show a lesser engagement in joint patent applications with foreign entities compared to universities and enterprises. Many collaborations in the network are incidental or single, and smaller entities such as small and micro-enterprises and ordinary universities or colleges have not been actively involved in industry-academia-research collaborations. The government and relevant agencies can guide industry-academia-research joint patent applications by streamlining incentive policies, facilitating patent information channels, and promoting cross-regional collaborations.
-
中枢神经系统由神经元和神经胶质细胞两大类组成，神经胶质细胞主要包括星形胶质细胞、小胶质细胞、少突胶质细胞等。小胶质细胞占神经胶质细胞总数的10%~15%，是存在于中枢神经系统内的单核巨噬细胞[1]。正常生理状态下小胶质细胞呈现分枝状并发挥免疫监视作用以维持中枢神经系统的稳态；病理状态下，小胶质细胞能够被β-淀粉样蛋白（amyloid β, Aβ）、α-突触核蛋白(α-synuclein, α-Syn）等错误折叠的蛋白质、细胞碎片以及细菌细胞壁脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）等异常激活[2−3]。受损或异常激活的小胶质细胞引发中枢神经系统内的系列炎症反应即神经炎症，已有研究证明神经炎症始终伴随在阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）、帕金森病（Parkinson’s disease，PD）等神经退行性疾病发生发展的整个过程中，并造成神经元丢失和Aβ病理及微管相关蛋白Tau病理加重[4−5]。
激活的小胶质细胞会产生不同的表型，在瞬息万变的脑环境中，精确区分并调节小胶质细胞的表型对治疗AD至关重要[6]。神经炎症初期，小胶质细胞由静息状态激活至M1表型，此时的小胶质细胞分枝缩短变粗，胞体增大并释放大量肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素6（interleukin 6, IL-6）和白细胞介素1β（IL-1β）等促炎细胞因子，这些毒性物质可以消灭入侵的病原体[7]。然而，随着时间推移急性炎症转化为慢性炎症，小胶质细胞的慢性活化以及过度积累的毒性促炎细胞因子会导致神经元损伤[8]。小胶质细胞还可以通过替代激活途径被激活至M2表型，此时的小胶质细胞分泌白细胞介素10（IL-10）、精氨酸酶1（arginase 1, ARG1）等抗炎细胞因子，起到神经保护和组织修复的作用[9]，提示逆转小胶质细胞过度激活、调节小胶质细胞极化表型对治疗胶质增多症及AD有着重要作用。
IL-27是IL-12家族中的一种异二聚体细胞因子，由称为EB病毒诱导蛋白3（Epstein-Barr virus-induced protein 3，EBI3）和称为p28的p35相关蛋白组成[10]。IL-27与由gp130和白细胞介素-27受体α（IL-27Rα）组成的异二聚体受体复合物结合，IL-27Rα主要存在于巨噬细胞、小胶质细胞、B细胞等炎症细胞表面[11]。IL-27的功能最初被认为参与Th1细胞的早期发育[12]，最近的研究表明IL-27在小鼠缺血性脑卒中模型、小鼠脑出血模型中增加神经元存活率，降低了神经功能缺损和脑部病理[11,13]，而其对小胶质细胞作用还有待探究。本研究旨在观察IL-27对LPS或Aβ1-42诱导小胶质细胞过度激活的影响。
1. 材 料
1.1 试 剂
DMEM高糖培养基（美国Gibco公司）；胎牛血清（以色列Biological Industries公司）；LPS（美国Sigma公司）；IL-27（美国MCE公司）；Aβ1-42（上海吉尔生化有限公司）；BCA蛋白浓度检测试剂盒、RIPA裂解液、SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（5×，上海碧云天生物技术有限公司）；一步法凝胶制备试剂盒、ECL发光液（杭州福德生物科技有限公司）；蛋白Marker（美国Thermo公司）；PVDF膜、蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂（美国Millipore公司）；总RNA提取试剂盒EasyPure RNA Kit（北京全式金生物技术有限公司）；HIScriptⅢ RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)逆转录试剂盒、Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix RT-qPCR试剂盒（南京诺唯赞生物技术股份有限公司）；TNF-α、IL-6、IL-1β ELISA检测试剂盒、TNF-α抗体、IL-1β抗体、β-actin抗体（爱博泰克生物公司）；Iba1抗体、NF-кB抗体、p- NFкB抗体、IкBα抗体、p-кBα抗体、山羊抗兔IgG、山羊抗鼠IgG（美国Cell Signaling Technology公司）；其余试剂均为国产市售分析纯。
1.2 仪 器
全波长酶标仪、PCR仪、RT-qPCR仪、Nanodrop微量分光光度计（美国Thermo公司）；电泳仪、转膜仪（美国Bio-Rad公司）；化学发光成像系统（中国Tanon公司）；氮吹仪（上海安谱实验科技股份有限公司）。
1.3 细 胞
小鼠小胶质细胞BV-2购自上海iCELL公司。
1.4 动 物
SPF级C57BL/6小鼠，5~6周龄，雄性，购自江苏集萃药康生物科技股份有限公司，实验动物使用许可证号：SCXK（苏）2023-0009。小鼠饲养于独立通风笼盒，实验室温度24~26 ℃，相对湿度60%~80%，保持12 h昼夜交替，给予标准饲料及饮用水。所有动物实验均符合动物伦理委员会标准。
2. 方 法
2.1 Aβ1-42制备
准确称量Aβ1-42 2.0 mg并加入六氟异丙醇500 mL，涡旋后超声10 min使其充分溶解，放置于4 ℃过夜。次日用氮吹仪进行氮吹以充分去除管内六氟异丙醇，−80 ℃放置2 h后放入冻干机冻干。将冻干的Aβ1-42复溶于DMSO中，进行涡旋并超声10 min使其充分溶解，加入已过滤的PBS稀释后置4 ℃冰箱寡聚24 h，BCA法测定蛋白浓度。
2.2 BV-2细胞培养
2.2.1 细胞复苏
将实验室保藏的BV-2细胞从液氮罐中取出后放入37~42 ℃温水中迅速摇动使其快速融化，室温
1000 r/min离心5 min后用含有10%胎牛血清的DMEM高糖培养基重悬并接种至T25细胞瓶中，置含5% CO2的细胞培养箱中37 ℃培养。2.2.2 细胞传代
细胞汇合度约80%时即可传代。弃去细胞瓶中培养基，用PBS润洗细胞后加入含有10%胎牛血清的DMEM高糖培养基3 mL，用移液枪轻柔地将细胞从壁上吹下，按照1∶3的比例传代至T25细胞瓶中，置于含5% CO2的细胞培养箱中37 ℃培养。
2.2.3 细胞冻存
细胞汇合度约80%时即可冻存。按“2.2.2”项下方法获得细胞悬液后，室温
1000 r/min离心5 min，弃去上清液，向离心管中加入细胞冻存液后轻轻吹打混匀，按每管1.5 mL加入冻存管中后封口膜封口，在管上标记细胞名称、代数、日期等信息后于−80 ℃或液氮中保存。2.3 BV-2细胞铺板及分组
将BV-2细胞按每孔5×105个的密度接种于六孔板中，并设置分组如下：空白对照组、LPS（100 ng/mL）组、LPS（100 ng/mL）+IL-27（5 ng/mL）组，造模及药物干预12 h；空白对照组、Aβ1-42（5 μmol/L）组、Aβ1-42（5 μmol/L）+IL-27（5 ng/mL）组，造模及药物干预24 h。
2.4 动物分组、造模及给药
小鼠适应性饲养1周后随机分为空白对照组、模型组（LPS组）、给药组（LPS +IL-27组），每组各12只。IL-27组侧脑室注射IL-27（10 ng/μL，每侧2 μL），术前12h禁食不禁水，麻醉小鼠后将其固定于脑立体定位注射仪上，剔除颅顶毛发后用碘伏消毒，剪开头皮暴露出前囟，在前囟后侧0.5 mm，矢状缝两侧1.0 mm处进行钻孔，微量进样器垂直进入侧脑室后缓慢注射IL-27，缝合伤口；空白对照组和LPS组注射等体积生理盐水，其余操作同给药组。
模型组和给药组于术后第1天开始腹腔注射LPS（1 mg/kg），共4 d。空白对照组按照相同方式注射等体积生理盐水。
2.5 Western blot检测
2.5.1 IL-27对LPS或Aβ1-42诱导BV-2细胞内TNF-α、IL-1β、NF-κB、p-NF-κB、IκBα和p-IκBα表达量的影响
细胞铺板、分组同“2.3”项。造模及IL-27干预后，提取细胞总蛋白。弃去六孔板内的培养基并用预冷的PBS润洗细胞3次，每孔内加入含有磷酸酶抑制剂和蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液100 μL，用刮刀将细胞刮下后转移至提前预冷的1.5 mL EP管中并放置于冰上裂解30 min。将细胞裂解液于4 ℃，
12000 r/min离心20 min后小心吸取上清液并通过BCA法测定蛋白浓度，加入1/4体积的5×上样缓冲液后金属浴95 ℃煮沸10 min。配制SDS-PAGE胶并以80 V恒压完成电泳，以300 mA恒流湿转法将条带转移至PVDF膜上，取出PVDF膜用5% BSA封闭液封闭2 h，使用新配制的TBST洗膜5次，孵育TNF-α、IL-1β、NF-κB、p-NF-κB、IκBα、p-IκBα一抗，于4 ℃过夜。次日洗膜后加入与一抗对应的山羊抗兔二抗或山羊抗鼠二抗孵育2 h，洗膜5次，滴加ECL发光液进行成像。2.5.2 IL-27对LPS诱导小鼠脑内TNF-α、IL-1β表达量的影响
动物分组、给药同 “2.4”项。造模及给药完成后处死小鼠，迅速取小鼠全脑后置于4 mL EP管内，每管加入含有磷酸酶抑制剂和蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液2 mL，使用手术剪将脑组织剪碎后用组织匀浆机充分研磨脑组织，于冰上涡旋裂解，提取并测定组织总蛋白。制样和电泳等操作同“2.5.1”项。
2.6 RT-qPCR检测
2.6.1 M1/M2型小胶质细胞表面标志物mRNA表达
细胞铺板、分组同“2.3”项。造模及IL-27干预后，按照总提取试剂盒说明书提取细胞内总RNA，于微量分光光度计上测定RNA浓度后，按照HIScriptⅢ RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)试剂盒进行逆转录获得cDNA。按照Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix试剂盒进行RT-qPCR。首先配制2×Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix和引物的混合反应体系，混合均匀后在96孔半裙边板中加入混合体系8 μL/孔，再加入模板cDNA （每孔2 μL）。反应程序如下：预变性95 ℃ 30 s；模板变性95 ℃ 10 s，退火60 ℃ 30 s，循环40次；绘制溶解曲线95 ℃ 15 s，60 ℃ 60 s，95 ℃ 15 s。使用2−ΔΔCt法计算目的基因相对表达量。引物序列参见表1。
Table 1. Primer sequences for RT- PCRBiological indicator Forward primer (5'→3') Reverse primer (5'→3') Tnf TTGGTGGTTTGTGAGTGTGAG GACGTGGAACTGGCAGAAGAG Il6 TTGGTCCTTAGCCACTCCTT TAGTCCTCCTACCCCAATT Il1b ATCTTTTGGGGTCCGTCAACT GCAACTGTTCCTGAACTCAACT Nos2 GTGGACGGGTCGATGTCAC GTTCTCAGCCCAACAATACAAA Nlrp3 ACAAGCCTTTGCTCCAGACCCTAT TGCTCTTCACTGCTATCAAGCCCT Fcgr2b GGGAACCAATCTCGTAGTGTCTGT CCAGAAAGGCCAGGATCTAGTG Cd86 GAGCGGGATAGTAACGCTGA GGCTCTCACTGCCTTCACTC Fcgr3 GTCCAGTTTCACCACAGCCTTC GCCAATGGCTACTTCCACCAC Chil3 GGGCATACCTTTATCCTGAG CCACTGAAGTCATCCATGTC Il10 GGTTGCCAAGCCTTATCGGA ACCTGCTCCACTGCCTTGCT Arg1 GTGAAGAACCCACGGTCTGT CTGGTTGTCAGGGGAGTGTT Actb AGCCATGTACCTAGCCATCC TTTGATGTCACGCACGATTT 2.6.2 小鼠脑内炎症因子mRNA表达
动物分组、给药同“2.4”项。造模及给药完成后处死小鼠，迅速取小鼠全脑后置于研钵中，加入液氮后充分研磨使其成为匀浆。提取RNA、逆转录及RT-qPCR同“2.6.1”项。
2.7 ELISA检测小鼠脑内炎症因子表达
动物分组、给药同“2.4”项。造模及给药完成后处死小鼠，迅速取小鼠全脑后置于4 mL EP管内，每管加入PBS2 mL，使用手术剪将脑组织剪碎后用组织匀浆机充分研磨脑组织，4 ℃，
12000 r/min离心20 min后小心吸取上清液，按照ELISA试剂盒说明书测定小鼠脑内TNF-α、IL-1β和IL-6的表达水平。2.8 免疫组化检测小鼠海马中Iba1的表达
动物分组、给药同“2.4”项。造模及给药完成后处死小鼠，迅速取小鼠全脑并放置于4%多聚甲醛中室温固定24 h。用石蜡将组织包埋，并进行切片、封闭、孵育抗体、DAB显色、复染细胞核和封片等操作，使用扫描仪扫描切片。
2.9 IL-27在正常人和AD患者脑内表达量的分析
通过GEO数据库中的GSE48350数据集分析IL-27在正常人和AD患者脑内的差异表达情况。在海马区，正常组AD组各19例；在内嗅皮层区，正常组19例，AD组15例；在额叶皮层区，正常组27例，AD组21例。
2.10 统计学分析
实验数据使用GraphPad Prism 9.0进行统计分析和作图，每组数据（至少3次独立实验）以$\bar{x} $ ± s表示。多组样本间采用单因素方差分析，以P < 0.05认为有统计学意义。
3. 结 果
3.1 IL-27在正常人和AD患者脑内表达量的分析
使用GEO数据库GSE48350数据集分析IL-27在正常人和AD患者脑内的差异表达情况，结果如图1所示，相较于正常人，AD患者海马体、内嗅皮层以及额叶皮层中的IL-27含量降低[14]。
![]()
Figure 1. Analysis of IL-27 expression in the brains of normal and Alzheimer’s disease（AD） patients. In Hippocampus region, control group n=19, AD group n=19. In the entorhinal cortex region, control group n=19, AD group n=15. In the frontal cortex region, control group n=27, AD group n=21. (ns: no significance vs control group)3.2 IL-27对LPS诱导的小鼠脑内小胶质细胞激活的影响
为检测IL-27对小胶质细胞异常激活及神经炎症的影响，使用LPS诱导小鼠并给予IL-27。收集小鼠脑组织进行免疫组化，检测小鼠脑内Iba1表达量，结果如图2所示。与空白对照组相比，LPS组小鼠海马中Iba1+小胶质细胞数量增加；与LPS组相比，IL-27组小鼠海马中Iba1+小胶质细胞数量下降。证明IL-27能缓解小鼠脑内由LPS诱导的小胶质细胞异常激活。
![]()
Figure 2. Effect of IL-27 on activation of microglia in lipopolysaccharide(LPS)-induced mice brainA: Expression of Iba1 in the brain of normal mice, LPS-induced inflammation mice, and IL-27 treated mice after LPS-induced inflammation was detected by immunohistochemistry (Scale bar=100 μm); B: Quantitative analysis of Iba1+ levels in A ($\bar{x} $ ± s, n=3, ###P < 0.001 vs control group; **P < 0.01 vs LPS group)3.3 IL-27对LPS诱导的小鼠脑内炎症因子表达量的影响
相较于空白对照组，LPS组小鼠脑内促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达量显著增多；相较于LPS组，IL-27组小鼠脑内促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达量显著减少，结果如图3所示。说明IL-27能逆转LPS诱导的神经炎症。
![]()
Figure 3. Effect of IL-27 on the expression of inflammatory factors in the brain of mice induced by LPS ($\bar{x} $ ± s)A: mRNA levels of Il1b, Il6 and Tnf were detected by RT-qPCR; B: Levels of IL-1β, IL-6, TNF-α were detected by ELISA; C: Representative images of the levels of IL-1β, TNF-α were detected by Western blot; D-E: Quantitative analysis of protein levels of TNF-α/actin and IL-1β/actin(n=5 in ELISA, the other n=3) ###P < 0.001, ##P < 0.01 vs control group; ***P < 0.001, **P < 0.01 vs LPS group3.4 IL-27对LPS诱导的小胶质细胞M1/M2型细胞标志物的影响
为检测IL-27对LPS诱导的小胶质细胞表型的影响，实验分为空白对照组、LPS（100 ng/mL）组和LPS（100 ng/mL）+ IL-27（5 ng/mL）组，造模及药物干预12 h。相较于空白对照组，LPS组M1型小胶质细胞标志物Il1b、Tnf、Nos2、Nlrp3、Fcgr2b、Cd86、Fcgr3及M2型小胶质细胞标志物Il10、Chil3、Arg1的表达量显著增加，说明小胶质细胞由未激活的静息态被LPS激活；给予IL-27后，与LPS组相比，IL-27组M1型小胶质细胞标志物Il1b、Tnf、Nos2、Nlrp3、Fcgr2b的表达量显著减少，而M2型小胶质细胞标志物Il10、Chil3、Arg1的表达量进一步显著增加，结果如图4所示。说明IL-27能够将LPS激活的M1型小胶质细胞转变为M2型，逆转LPS诱导的小胶质细胞过度激活。
![]()
Figure 4. Effect of IL-27 on mRNA expression of M1/M2 cell markers in LPS-induced microglia ($\bar{x} $ ± s, n=3)A: mRNA levels of M1-specific makers Il1b, Tnf, Nos2, Nlrp3, Fcgr2b, Cd86 and Fcgr3 were detected by RT-qPCR; B: mRNA levels of M2-specific makers Il10, Chil3 and Arg1 were detected by RT-qPCR ###P < 0.001, ##P < 0.01, #P < 0.05 vs control group; ***P < 0.001, **P < 0.01, *P < 0.05 vs LPS group3.5 IL-27对Aβ1-42诱导的小胶质细胞M1/M2型细胞标志物的影响
为检测IL-27对Aβ1-42诱导的小胶质细胞表型的影响，实验分为空白对照组、Aβ1-42（5 μmol/L）组和Aβ1-42（5 μmol/L）+IL-27（5 ng/mL）组，造模及药物干预24 h。相较于空白对照组，Aβ1-42组M1型小胶质细胞标志物Il1b、Tnf、Nlrp3、Nos2及M2型小胶质细胞标志物Il10、Chil3、Arg1的表达量显著增加，说明小胶质细胞由未激活的静息态被Aβ1-42激活；给予IL-27后，与Aβ1-42组相比，IL-27组M1型小胶质细胞标志物Il1b、Tnf、Nlrp3的表达量显著减少，而M2型小胶质细胞标志物Il10、Chil3、Arg1的表达量显著增加，结果如图5所示。说明IL-27能够将Aβ1-42激活的M1型小胶质细胞转变为M2型，逆转Aβ1-42诱导的小胶质细胞过度激活。
![]()
Figure 5. Effect of IL-27 on mRNA expression of M1/M2 cell markers in Aβ1-42-induced microglia ($\bar{x} $ ± s, n=3)A: mRNA levels of M1-specific makers Il1b, Tnf, Nlrp3 and Nos2 were detected by RT-qPCR; B: mRNA levels M2-specific makers of Il10, Chil3 and Arg1 were detected by RT-qPCR ###P < 0.001, ##P < 0.01, #P < 0.05 vs control group; ***P < 0.001, **P < 0.01, *P < 0.05 vs Aβ1-42 group3.6 IL-27对Aβ1-42诱导的小胶质细胞内NF-κB、p-NF-κB、IκBα、p-IκBα激活的影响
为探究IL-27改善小胶质细胞过度激活的途径，用Aβ1-42和IL-27孵育小胶质细胞24h。相较于空白对照组，Aβ1-42组小胶质细胞内NF-κB磷酸化、IκBα磷酸化水平显著增加；相较于Aβ1-42组，IL-27组小胶质细胞内NF-κB磷酸化、IκBα磷酸化水平显著下降；证明IL-27能够改善Aβ1-42诱导的NF-κB、IκBα异常激活。
![]()
Figure 6. Effect of IL-27 on activation of NF-κB, p-NF-κB, IκBα, and p-IκBα in microglia induced by Aβ1-42A: Levels of NF-κB, p-NF-κB, IκBα and p-IκBα were detected by Western blot; B-C: Quantitative analysis of protein levels of p-NF-κB/NF-κB and p-IκBα/ IκBα in A (`x ± s, n=3, ###P < 0.001, ##P < 0.01, #P < 0.05 vs control group; ***P < 0.001, **P < 0.01, *P < 0.05 vs Aβ1-42 group)4. 讨 论
LPS也称为内毒素，是革兰氏阴性菌外膜的主要成分，目前被认为是最有效的促炎刺激之一[15]。LPS在神经退行性疾病领域研究十分广泛，其主要通过由Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）信号通路介导的小胶质细胞过度激活进而造成神经元死亡[16]，同时还会造成海马和皮质内Aβ的积累[17]。而在AD患者脑内，小胶质细胞主要通过Toll样受体2（Toll-like receptor 2，TLR2）和TLR4识别Aβ[18]，进而分泌大量神经毒性的促炎因子造成神经元损伤。因此，本研究选取LPS或Aβ1-42诱导的细胞以及LPS诱导的小鼠模型探究IL-27的抗炎作用。
近年来许多科学家致力于IL-27在中枢神经系统中作用的研究，尽管其发挥作用的途径主要与调节T细胞的反应有关，但有研究指出IL-27还有可能作用于神经系统中的其他细胞[19]。同时，IL-27作为一种多效细胞因子，通过氧化应激、细胞凋亡、自噬、表观遗传修饰、调节细胞因子分泌与表达等多种途径影响神经元存活，且根据作用细胞不同，IL-27可能会产生相反的效果[20]。本研究发现IL-27能够促进LPS或Aβ1-42诱导的小胶质细胞从具有神经毒性M1表型转化为神经保护的M2表型，并抑制LPS诱导的小鼠脑内小胶质细胞过度激活及慢性神经炎症。
核因子-κB（NF-κB）参与广泛的炎症反应，在AD中被认为是神经炎症恶性循环的核心[21]。在非激活状态下，NF-κB与其抑制因子IκB结合形成p65-p50-IκB三聚体，定位于胞质中且无法发挥作用；当受到细胞碎片、病原体、毒性细胞因子等的刺激后，由于磷酸化级联反应的作用，IκBα被蛋白酶体降解，使得p65-p50二聚体得以进入细胞核并且促进下游靶基因的转录[22]。大部分NF-kB的靶基因均为促炎细胞因子，由此引发慢性炎症进而导致神经元死亡[23]。本研究通过Western blot检测Aβ1-42诱导后IL-27对小胶质细胞内NF-κB、p-NF-κB、IκBα、p-IκBα的表达，发现IL-27能逆转Aβ1-42诱导的小胶质细胞内NF-κB、IκBα磷酸化水平。上述结果提示，IL-27可能通过IκB/NF- κB途径改善小胶质细胞过度激活。
综上所述，本研究结果提示，IL-27改善LPS的诱导小鼠脑内小胶质细胞过度激活及M1型小胶质细胞介导的神经炎症，同时IL-27通过IκB/NF- κB途径逆转Aβ1-42诱导的小胶质细胞表型变化。
《中国药科大学学报》入选2024年度“中国高校科技期刊
建设示范案例库•百佳科技期刊” -
表 1 生物医药产业各省市共同申请专利数量分布表
省/市 总计共同申请专利数量 广东 1521 上海 1065 江苏 828 北京 802 山东 579 浙江 544 湖北 306 四川 267 福建 242 河南 217 
下载: 导出CSV
表 2 产学研共同申请专利数量排名前十的高校、企业与科研机构
排 名 高校申请人（专利数） 企业申请人（专利数） 科研机构申请人（专利数） 1 浙江大学（216） 广东粤微食用菌技术有限公司（68） 中国科学院上海药物研究所（334） 2 复旦大学（191） 上海邦耀生物科技有限公司（65） 上海医药工业研究院（290） 3 江南大学（169） 深圳华大基因科技有限公司（54） 国家科学研究中心（法国）（237） 4 华南农业大学（159） 诺华股份有限公司（52） 国家医疗保健研究所（法国）（133） 5 中山大学（149） 北京福纳康生物技术有限公司（45） 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)（66） 6 清华大学（142） 博奥生物集团有限公司（42） 中国科学院化学研究所（53） 7 上海交通大学（138） 江西本草天工科技有限责任公司（38） 中国医学科学院医药生物技术研究所（53） 9 厦门大学（120） 无锡迪腾敏生物科技有限公司（35） 中国医学科学院药物研究所（51） 8 华中农业大学（116） 浙江辉肽生命健康科技有限公司（34） 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院（43） 10 华东师范大学（110） 正大天晴药业集团股份有限公司（31） 上海细胞治疗研究院（41）
下载: 导出CSV
表 3 不同类型产学研共同申请专利法律状态数量分布表
共同申请专利
法律状态类型产学共同申请
专利/件产研共同申请
专利/件学研共同申请
专利/件授权 2271 1361 1208 实质审查 2207 883 1088 驳回 701 412 292 撤回 539 312 286 未缴年费 161 80 127 公开 102 59 59 放弃 5 7 2 权利恢复 1 1 0
下载: 导出CSV
表 4 A61P35/00（抗肿瘤药）领域专利技术功效
技术功效类型 专利数量/件 肿瘤避免 289 稳定性提高 163 安全提高 142 成本降低 139 活性降低 125 特异性 111 副作用降低 103 制备方法复杂性降低 91 应用前景 87 增殖降低 79
下载: 导出CSV
表 5 代表性产学研共同申请专利合作案例概况
专利名称 申请号 技术要点 合作申请人 合作类型 成果转化 壳聚糖衍生物及其制备方法
与在制药中的应用CN1439655A 壳聚糖；难溶性药物增溶 中国药科大学 江苏恒瑞医药股份有限公司 产学共同申请专利合作 已转让 一种防治少儿呼吸系统疾病的
药物组合物及其制备方法CN1634340A 中药组合物；小儿哮喘 江苏省中医药研究院 南京开来医药科技开发有限责任公司 产研共同申请专利合作 已转让 包含托法替布的药物
组合物和药物制剂CN115887408A 托法替布新制剂 江苏慧聚药业股份有限公司 中南大学 产学共同申请专利合作 否
下载: 导出CSV
表 6 产学共同申请专利合作网络拓扑属性
排 名 合作主体 度中心度 合作主体 中介中心度 合作主体 链接强度 1 江南大学 48 中国药科大学 3443.0 江南大学 无锡迪腾敏生物科技有限公司 35 2 中国药科大学 42 江南大学 2115.0 江南大学 得利斯集团有限公司 15 3 南京中医药大学 18 南京中医药大学 2024.0 东南大学 南京大户生物科技有限公司 14 4 南京农业大学 16 神威药业集团有限公司 1764.0 四川大学 常州寅盛药业有限公司 8 5 苏州大学 14 正大天晴药业集团股份有限公司 1343.5 中国药科大学 南京映海月生物科技有限公司 7
下载: 导出CSV
表 7 产研共同申请专利合作网络拓扑属性
排 名 合作主体 度中心度 合作主体 中介中心度 合作主体 链接强度 1 江苏省农业科学院 11 江苏省农业科学院 55.0 正大天晴药业集团股份有限公司 上海医药工业研究院 11 2 中国科学院上海药物研究所 9 中国科学院上海药物研究所 51.5 江苏靶标生物医药研究所有限公司 常州南京大学高新技术研究院 11 3 中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究所 7 中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究所 27.0 南京碳硅人工智能生物医药技术研究院有限公司 南京大学人工智能生物医药技术研究院 10 4 江苏省中国科学院植物研究所 6 江苏省中国科学院植物研究所 20.0 苏州方科生物科技有限
公司苏州系统医学研究所 9 5 苏州方科生物科技有限公司 4 苏州方科生物科技有限公司 13.0 江苏奥赛康药业有限公司 中国科学院广州生物医药与健康研究院 8
下载: 导出CSV
表 8 学研共同申请专利合作网络拓扑属性
排 名 合作主体 度中心度 合作主体 中介中心度 合作主体 链接强度 1 南京大学 11 中国科学院上海药物研究所 748.0 中国药科大学(杭州)创新药物研究院 中国药科大学 9 2 江南大学 11 南京大学 708.5 中国科学院上海药物研究所 江南大学 8 3 中国药科大学 10 江南大学 648.0 江苏省农业科学院 淮阴工学院 7 4 南京农业大学 7 中国药科大学 414.5 南京工业大学大丰海洋产业研究院 盐城师范学院 7 5 江苏省农业科学院 6 江苏省中国科学院植物研究所 313.0 苏州大学张家港工业技术研究院 苏州大学 6
下载: 导出CSV
-
[1] He YB. The theoretical model of industry-university-research collaboration innovation[J]. Sci Res Manag(科学学研究), 2012, 30(2): 165-174. doi: 10.16192/j.cnki.1003-2053.2012.02.002 [2] Chen F, Wu C, Yang W. A new approach for the cooperation between academia and industry: an empirical analysis of the triple helix in East China[J]. Sci Technol Soc, 2016, 21(2): 181-204. doi: 10.1177/0971721816640617
[3] Liu YL. The construction path of university innovation system in the new era — Interpretation based on "China's Education Modernization 2035" [J]. China Univ Sci Technol(中国高校科技) , 2019(12): 45-48. [4] Narin F. Patents as indicators for the evaluation of industrial research output[J]. Scientometrics, 1995, 34(3): 489-496.
[5] Wang W, Ding ZQ. Reflections on the construction of pharmaceutical and traditional Chinese medicine disciplines based on patent information analysis: taking "Double First-Class" universities as an example[J]. J China Pharm Univ(中国药科大学学报), 2023, 54(6): 769-776. [6] Zhu W, Bai D. Analysis on the current situation of patent cooperation between school and enterprise[C]//2019 International Conference on Economic Management and Model Engineering(ICEMME). IEEE, 2019: 8-11.
[7] Li WJ, Chen JL. Research on the supply of industry-university-research cooperation innovation by local colleges and universities — A case study of Guangdong[J]. Decis Inf(决策与信息), 2016(10): 143-147. [8] Hui X, Su-sheng W, Zhi-chao L. Research on Shenzhen university-industry cooperation based on patent data analysis[C]//2010 International Conference on Management Science & Engineering 17th Annual Conference Proceedings. IEEE, 2010: 865-870.
[9] Du Y, Wang M, Yin Y. Research on innovation cooperation network of Chinese universities based on patent data[J]. J Eng Technol Manag, 2024, 71: 101784. doi: 10.1016/j.jengtecman.2023.101784
[10] Molling G, Hidalgo G, Santini M, et al. Coopetition and innovation in high-tech firms: what we can learn from analysis of the semiconductor industry's patents[J]. World Pat Inf, 2023, 72: 102157. doi: 10.1016/j.wpi.2022.102157
[11] Xue Q, Cao YY, Ding T, et al. Research on the patent layout of the biomedical industry[J]. China Inven Pat(中国发明与专利), 2022, 19(1): 19-26,65. [12] Qiu HQ, Yang ZJ, Guo F, et al. Research on the development trend of the future biomedical industry[J]. Chin J Biotechnol (生物工程学报), 2024, 44(01): 8-18. doi: 10.13523/j.cb.2308100 [13] Wang CL, Li ZY. The current status and trend of innovation and development of traditional Chinese medicine in China[J]. Chin J New Drugs(中国新药杂志), 2023, 32(20): 2013-2021. [14] You DM, Liu S. Analysis and enlightenment on the evolution of Shenzhen's Industry-University-Research Patent Cooperation Network[J]. Sci Technol Manag Res(科技管理研究), 2022, 42(17): 166-172. [15] Liu XD, Wang BB, Liu PR, et al. Analysis of the current status of effective invention patents of colleges and universities under the background of industry-university-research cooperation: taking Jiangsu Normal University as an example[J]. J Henan Sci Technol(河南科技), 2022, 41(14): 128-133. doi: 10.19968/j.cnki.hnkj.1003-5168.2022.14.027 [16] Deng GM, Li JQ, Liu Hong G, et al. Analysis of the research trend of gastrodia elata in China and research on development countermeasures for the future—Taking 20 years of patent data as an example[J]. Agric Technol(农业与技术), 2024, 44(5): 171-177. doi: 10.19754/j.nyyjs.20240315038 [17] Diestel R, Schrijver A, Seymour P. Graph theory[J]. Oberwolfach Rep, 2005, 2(1): 135-183. doi: 10.4171/owr/2005/03
-
期刊类型引用(1)
1. 周迎芳，韩琮定，任胜杰，文贵辉，文利新. 基于高脂饮食探究不同膳食油脂对小鼠附睾脂肪沉积的影响. 粮食与油脂. 2025(03): 55-59+66 . 
百度学术
其他类型引用(1)
计量
- 文章访问数: 25
- HTML全文浏览量: 12
- PDF下载量: 6
- 被引次数: 2
