摘要: 用一对与大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ基因两侧序列互补的寡核苷酸Ｅ１，Ｅ２６和引物，以大肠杆菌野生株ＣＰＵ２１０００９的染色体ＤＮＡ为模板，通过ＰＣＲ扩增得到约１．２ｋｂ的ＣＤＮＡ片段，将此片段插入ＰＫＫ２３３－２的ｔａｃ启动子下游，转化不同的大肠杆菌宿主菌株，结果表明以ＣＰＵ２１０００９为宿主菌时，转化子的酶表达量最高，重组Ｌ－天门冬酶胺酶占菌体总蛋白４８．３％，发酵液酶活力达４００ＩＵ／ｍｌ，比活为４