三种Tyrphostin对重组人蛋白激酶CK2全酶的影响
Effects of 3 Tyrphostins on Recombinant Human Protein Kinase CK2 Holoenzyme
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摘要: 目的：观察三种Tyrphostins AG1109、AG555和AG1394对重组人蛋白激酶CK2全酶的直接作用。方法：利用基因工程克隆、表达和纯化获得重组人蛋白激酶CK2α和β亚基，在体外等摩尔数混合构成有最大生物活性的重组CK2全酶，在不同条件下测定CK2的活性。CK2活性通过测定转移到CK2底物上的[γ－^32P]ATP或[γ-^32P]GTP的[^32P]放射活度来检测。结果：重组人CK2是一种Ca^2 、cAMP和cGMP二信使非依赖性蛋白激酶，与天然CK2的性质一致。AG1109对重组人CK2全酶具有较强的抑制作用，IC50为9．7μmol／L，抑制作用稍大于已知CK2抑制剂DRB和A3。AG555对重组人CK2全酶具有一定的抑制作用，而AG1394则对人CK2全酶基本无影响。AG1109对重组人CK2的动力学研究表明：它与GTP呈现以竞争性为主的混合型抑制作用，与酪蛋白呈非竞争性抑制作用。结论：AG1109不仅是酪氨酸蛋白激酶的抑制剂，而且是一种十分有效的激酶CK2的抑制剂。重组人蛋白激酶CK2可作为一种较为简便筛选和开发有效的CK2抑制剂的分子靶点。
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Keywords:
- Protein kinase CK2 /
- Recombinant protein /
- Tyrphostin /
- AG1109 /
- AG555 /
- AG1394 /
- Enzyme kinetics
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