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噬菌体展示载体的构建

Construction of Vector for Phage Display

  • 摘要: 目的 构建适宜噬菌体展示的载体系统。方法 利用pCOMB3的LacZ强启动子,Pelb引导序列,包膜蛋白Ⅲ基因,用NHeI-XbaI双酶切,切除一个克隆位点;同时设计一对引物,用PET-28(a)^ 作模板扩增550bp片段,插入XhoI-SpeI位点之间,扩增质粒后用限制性内切酶,PCR,DNA测序等方法作鉴定。结果 切除了272bpNHeI-XbaI片段。插入片段后酶切鉴定显示:XhoI,SpeI单酶切,XbaI,NheI无酶切;所构质粒用XhoI SpeI双酶切及PCR扩增均可见550bp片段;测序结果正确。结论 成功构建了一种高拷贝,稳定,多用途,易于操作的噬菌体展示载体。

     

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