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人转化生长因子TGF-β3基因合成及其在大肠杆菌中的表达

Expression of Human Transforming Growth Factor β3 in E.coli BL21

  • 摘要: 目的:构建能高效表达人转化生长因子β3(TGF-β3)的基因工程菌。方法:用PCR方法扩增人转化生长因子β3的cDNA,将该cDNA片段插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL21/pET-TGF-β3。IPTG诱导表达。通过阳离子交换、变性分子筛层析纯化重组蛋白。用Western-blot杂交检测重组蛋白的免疫原性。结果:所构建的表达菌株,其TGF-β3的表达量占菌体总蛋白25%以上。经纯化获得了银染一条带的重组蛋白。免疫学检测表明重组蛋白具有较强的抗原特异性。结论:人转化生长因子β3在大肠杆菌中实现了高效表达,获得了具有免疫原性的重组TGF-β3。

     

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