摘要:
目的研究阻断平衡型核苷转运蛋白(ENTs)后对胰腺癌细胞膜转运5氟尿嘧啶(5-FU)能力的影响.方法培养的PANC-1细胞分为ENTs阻断组和ENTs非阻断组,阻断组用潘生丁将ENTs阻断,非阻断组则未用潘生丁.两组培养基中均加入5-FU 100 μg/ml.温育15,30 min,1,2,4 h后细胞用橡皮刮取收集.取等量细胞刮取液2份各100 μl,一份用毛细管区带电泳测定细胞内5-FU总量、另一份用作平行样本测定总蛋白含量.根据平行样本细胞总蛋白来确定细胞数,再依细胞体积计算单细胞内药物浓度.结果ENTs非阻断组细胞内5-FU浓度在15 min内上升较快,达66.99±10.16 pg/nl,为培养基中5-FU浓度的67%,30 min为83.75±5.333 pg/nl,1 h达高峰(92.86±1.604 pg/nl),为培养基中5-FU浓度的93%,以后处于平台.ENTs阻断组细胞内5-FU浓度上升较慢,15 min仅为ENTs非阻断组浓度的68.65%;30 min为ENTs非阻断组浓度的70.66 %;1 h达ENTs非阻断组的最高浓度;但此后ENTs阻断组细胞内5-FU浓度仍继续升高,2 h达138.3±9.769 pg/nl,为ENTs非阻断组的1.64倍(P<0.01).结果提示,完全阻断ENTs后早期细胞内5-FU浓度上升较慢,但随着细胞在5-FU内暴露时间延长,5-FU在细胞内浓聚作用明显.结论阻断胰腺癌细胞膜上ENTs核苷转运蛋白可增加5-FU在细胞内的浓聚.