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抗栓肽Ala~(34)→Trp突变体的表达及活性研究
汤慧
,
劳兴珍
,
郑珩
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中国药科大学学报
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2007
>
38(6)
: 562-565.
汤慧, 劳兴珍, 郑珩. 抗栓肽Ala~(34)→Trp突变体的表达及活性研究[J]. 中国药科大学学报, 2007, 38(6): 562-565.
引用本文:
汤慧, 劳兴珍, 郑珩. 抗栓肽Ala~(34)→Trp突变体的表达及活性研究[J]. 中国药科大学学报, 2007, 38(6): 562-565.
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抗栓肽Ala~(34)→Trp突变体的表达及活性研究
汤慧
,
劳兴珍
,
郑珩
中国药科大学生命科学与技术学院
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目的:将抗栓肽34位的丙氨酸突变为色氨酸,构建活性较高的突变体。方法:通过设计合成两对引物经PCR获得抗栓肽突变体基因,利用质粒pET32a(+)作为载体,在大肠杆菌BL21(DE4)内表达。利用融合蛋白本身的组氨酸标签,以金属亲和色谱进行纯化,然后用肠激酶切除融合部分,所得蛋白用体外抗血小板凝集实验检测其活性。结果与结论:抗栓肽突变体以可溶形式高效表达,活性检测显示其抑制二磷酸腺苷诱导的血小板聚集的IC50为150 nmol/L。与原型蛋白相比,突变体活性明显提高。
关键词:
抗栓肽突变体
/
色氨酸
/
表达
/
抗血小板
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