摘要
为改善阿奇霉素（AZI）苦味与服药顺应性，以乙基纤维素（EC）为载体，采用O/W乳化溶剂挥发法制备载阿奇霉素口服微球（AZI-EC MS），对其释放与掩味效果进行初步考察，并通过差式扫描量热法、红外光谱和扫描电镜表征。通过联合应用不同相对分子质量EC解决了微球突释问题，当药载质量比1∶1、混合EC（N22/T10，7∶3）为载体时，微球0.5 h累积释放量小于40%，8 h累积释放量可达90%；该微球载药量为（48.95±0.86）%，形态圆整，表面光滑。AZI味道极苦，苦味阈值浓度为9.93 μg/mL，所制备的AZI-EC MS掩味效果良好。结果表明，混合EC为载体的AZI-EC MS能够改善AZI苦味，提高患者顺应性，为AZI新制剂的研究开发奠定基础。
阿奇霉素（azithromycin，AZI）是由红霉素衍生的半合成氮杂内酯类抗生素，对多种革兰阳性菌和革兰阴性菌有
最近研究表明，稳定性好且便于贮存与携带的微型固体制剂更为适合儿科患
因此，本研究采用EC为载体材料，以O/W乳化溶剂挥发法制备阿奇霉素载药微球（AZI-EC MS），通过混合不同相对分子质量EC为载体的简易方法解决其突释问题并初步探讨释药机制。确定AZI苦味阈值浓度，得出苦味评价拟合方程并评价AZI-EC MS掩味效果，旨在制备改善AZI苦味，提高患者顺应性的口服微球，为AZI制剂研究与AZI苦味评价奠定基础。
阿奇霉素原料药（湖北展望药业有限公司，纯度99%）；乙基纤维素［型号：Aqualon
采用O/W乳化溶剂挥发法制备AZI-EC MS。精密称取EC 0.5 g溶于二氯甲烷10 mL，待其完全溶解后，精密称取AZI 0.5 g加至上述溶液作为油相，匀速滴入至高速搅拌的0.1 % SDS水相，搅拌挥发一定时间后，过滤冲洗微球，烘干至恒重后收集微球。连续过100目和200目筛取75~154 μm范围AZI-EC MS。
色谱条件：C18色谱柱，流动相：0.1 mol/L 磷酸氢二钾（20%磷酸调至pH 8.2）-甲醇（25∶75），检测波长：210 nm，流速：1 mL/min，柱温：30 ℃，进样量20 μL。
精密称取适量AZI-EC MS于2 mL量瓶，加入二氯甲烷待溶解完全后定容至刻度，摇匀后精密移取1 mL至10 mL量瓶以流动相定容至刻度，过膜取续滤液进HPLC测定。计算载药量：载药量（%）=所含药物重量/微球总重 × 100。
称取适量AZI-EC MS（含AZI 125 mg），以新鲜脱气磷酸氢二钠（pH 6.0）500 mL为释放介质，温度（37±0.5）℃，转速100 r/min测定释放度。于时间点0.5、1、3、6、8 h取样5 mL并补充同温同体积介质，过滤后取续滤液进HPLC测定，绘制累计释药曲线。
取AZI、EC（T10）、EC（N22）、AZI与EC（T10）和EC（N22）物理混合物（EC（N22）与EC（T10）质量比为7∶3，药载质量比为1∶1）、EC-AZI MS（EC（N22）与EC（T10）质量比为7∶3，药载质量比为1∶1）样品约5 mg于铝坩埚中，以升温速率10 ℃/min，升温范围30~300 ℃条件进行分析，绘制DSC曲线图。
6 000 c
使用导电胶分别将空白微球［EC（N22）与EC（T10）质量比为7∶3］与AZI-EC MS［EC（N22）与EC（T10）质量比为7∶3，药载质量比为1∶1］固定在铜板上，金粉涂覆导电扫描并拍照，扫描电镜观察微球形态与表面。
以经脱气处理的新鲜配制pH 7.4磷酸氢二钠5 mL为模拟口腔pH的释放介质，介质温度为（37±0.5） ℃，设恒温振荡器转速50 r/min，取药物/载体比例为1∶1、2∶1和3∶1处方载药微球以及AZI原料药（pure drug）适量（含AZI 125 mg）进行体外释放实验。于1、3和5 min分别取液1 mL并及时补充相同体积等温介质，样品经0.22 μm水系滤膜，取续滤液适量加流动相稀释后进HPLC测定。
取适量AZI原料药粉末，以纯净饮用水配制4.97、9.93、14.9、19.9、29.8、48.5和99.3 μg/mL等一系列质量浓度后，由7位19～25岁健康成人志愿者组成的小组进行AZI人体苦味阈值测试。要求志愿者以纯净水漱口后，取适量AZI溶液含至口腔中，并将舌头左右前后转动至溶液与舌苔充分接触，30 s后吐掉并用纯净水漱口数次，同法依次测试浓度递增的AZI溶液。志愿者对不同浓度AZI溶液的苦味意见根据苦味量表评分。苦味量表由0为“无味”、1为“微苦”、2为“中苦”和3为“强烈苦味”4种标准组成。记录志愿者评分并确定AZI苦味阈值。
为得到苦味评分与AZI浓度之间的数量关系，将所得志愿者平均评分与AZI浓度对数作多项式拟
以EC（T10）、EC（N22）、EC（N50）等不同相对分子质量EC为载体，制备载药微球。当药载质量比1∶1时，分别以T10、N22和N50型号EC为载体制得微球的载药量依次是（42.57±1.71）%、（47.66±0.85）%和（49.10±1.87）%。另外，如
Figure 1 Effect of molecular weight of ethylcellulose(EC) and ratio of azithromycin(AZI)/EC on cumulative drug release(A and B) and drug loading efficiency of AZI-EC microspheres (MS) (C) ( ± s, n=3)
**P<0.01;
进一步制备以不同比例混合EC（N22/T10）为载体，药载质量比为1∶1的微球，其释药结果如
综合考虑突释（0.5 h释放量小于40%）和累计释放百分率（8 h内释放量可达90%），确定药载质量比为1∶1，以混合EC（N 22/T 10， 7∶3）为载体制备AZI-EC MS。
缓释微球释药原理主要包括溶出、扩散、 溶蚀等。扩散原理又包括透膜扩散（零级释放）、 膜孔扩散（接近零级）和骨架材料扩散（非零级释放， Higuchi扩散模型）。将微球释药曲线与零级释放、Hixson crowell溶蚀模型、Baker-lonsdale球形扩散模型和Higuchi扩散模型等释药模型方程进行拟合，讨论微球释药机制。如
a formulation with drug/polymer ratio (1∶1)；
DSC分析结果如
Figure 2 DSC traces（A） and FTIR spectra（B）of AZI-EC MS(a) , EC（N22）(b) ,EC（T10）(c),AZI(d) and physical mixture(e)
如
Figure 3 Typical SEM images of blank EC MS (A),single blank EC MS (B),surface of blank EC MS (C),AZI-EC MS (D)singleAZI-EC MS (E),surface of AZI-EC MS (F)
3.3.3 体外模拟口腔pH内释放分析 接近唾液实际体积和pH的释放介质能够更好地模拟口腔环境。一般唾液pH范围在5.5～7.4之间，其中， 1～12月小儿唾液pH范围为5.7～7.0，大于pH 7.0时与小孩和成人唾液呈密切相
Figure 4 Dissolution profiles of different drug/polymer ratio EC microspheres, 37 °C, pH 7.4 dissolution medium ( ± s, n=3)
志愿者评价AZI原料药苦味结果如
Figure 5 Taste scores assigned by human volunteers to different azithromycin solutions(A) and the polynomial relationship with calculation score of pure drug and AZI-EC MS formulations(B)
为得到志愿者评分与AZI浓度之间的数量关系，将所得志愿者平均评分与AZI浓度对数作多项式拟合，得到lgc（AZI）与志愿者评分之间拟合方程为：Y=0.848 6
根据该多项式拟合方程，分别利用AZI、不同药载质量比处方微球在pH 7.4介质内1 min时的释放浓度计算苦味得分。多项式拟合曲线与计算结果如
改善苦味与服药顺应性在提高患者接受度及治疗效果方面具有重要意义。一项针对800多名儿科医生的调查报告显示，90.8%的急性病患者和83.9%的慢性病患者的依从性障碍主要是由药物不良口感引起
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