大肠杆菌L－天门冬酰胺酶Ⅱ基因的高效表达

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大肠杆菌L－天门冬酰胺酶Ⅱ基因的高效表达

刘景晶, 李晶, 吴梧桐, 胡梅清

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刘景晶, 李晶, 吴梧桐, 胡梅清. 大肠杆菌L－天门冬酰胺酶Ⅱ基因的高效表达[J]. 中国药科大学学报, 1996, (11).

引用本文:

刘景晶, 李晶, 吴梧桐, 胡梅清. 大肠杆菌L－天门冬酰胺酶Ⅱ基因的高效表达[J]. 中国药科大学学报, 1996, (11).

大肠杆菌L－天门冬酰胺酶Ⅱ基因的高效表达

1.
中国药科大学生物化学教研室
2.
南京铁道医学院生物化学教研室

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出版历程
- 刊出日期: 1996-11-24

摘要: 用一对与大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ基因（ＡｎｓＢ）两侧序列互补的寡核苷酸Ｅ１，Ｅ２作引物，以大肠杆菌野生株ＣＰＵ２１０００９的染色体ＤＮＡ为模板，通过ＰＣＲ扩增得到约１．２ｋｂ的ＤＮＡ片段，将此片段插入ｐＫＫ２３３－２的ｔａｃ启动子下游，转化不同的大肠杆菌宿主菌株，结果表明以ＣＰＵ２１０００９为宿主菌时，转化子的酶表达量最高，重组Ｌ－天门冬酰胺酶占菌体总蛋白４８．３％，发酵液酶活力达４００ＩＵ／ｍｌ；比活为４８ＩＵ／ｍｇ蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示纯化后的重组Ｌ－天门冬酰胺酶分子量与天然酶相同，均为１４０ＫＤ。
- 大肠杆菌 /
- L－天门冬酰胺酶Ⅱ /
- 基因表达

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