摘要: 目的：构建海因酶基因工程菌，以便实现对羟在苯甘氨酸的工业化生产。方法：利用PCR技术从恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida)9801中扩增得到海因酶基因，将该基因插入pMD18-T质粒，转化大肠杆菌（Bscherichia coli)通过地高辛标记原位杂交和海因酶活力测定两种方法，筛选出具有海因酶活力的阳性转化子。结果：工程菌E.coliBL21/pMD-dht的海因酶活力达到1700U/L，比野生菌恶臭假单胞9801菌的酶活力提高8倍。SDS-PAGE显示海因酶的单体分子量纸醉金迷为53KDa，海因酶的表达量约占菌体总可溶性蛋白的20%。结论：构建的海因酶基因工程菌已初步具有工业化应用价值。