醇酒酵母S—腺苷甲硫氨酸合酶基因克隆及其在大肠杆菌中的表达
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摘要: 目的：构建S－腺苷甲硫氨酸合酶基因工程菌,为酶促转化法生产S－腺苷甲硫氨酸奠定基础。方法：应用PCR技术从S－腺苷甲硫氨酸高产酿酒酵母染色体DNA中扩增得到S－腺苷甲硫氨酸合成酶基因sam2，将其克隆至表达载体pT7－7，转化大肠杆菌，1％琼脂糖电泳比较大小，筛选重组予。结果：SDS－PAGE显示重组菌S－腺苷甲硫氨合成酶亚基分子量约为42KDa，平均表达量约占菌体总可控性蛋白的42％，酶活达到14．1U/g湿菌体，比宿主菌酶活提高15．7倍。结论：酿酒酵母SAM合成酶基因在大肠杆菌中高效表达，重组菌已具有初步的工业化应用价值。
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关键词:
- S－腺苷甲硫氨酸合酶 /
- 克隆 /
- 表达
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