摘要: 目的：大规模培养具有高活力核苷磷酸化酶的产气肠杆菌突变株(E．aerogenes EAM-Z1)，利用静息细胞酶法合成抗肿瘤核苷药物中间体5—氟尿苷(FUR)。方法：补料分批培养产气肠杆菌，发酵过程流加葡萄糖、控制发酵液的pH和pO2，摇瓶培养基中加入底物胞苷诱导核苷磷酸化酶，通过酶法合成FUR时菌体对底物尿苷的转化率来研究菌体的核苷磷酸化酶活力。结果：葡萄糖既可满足产气肠杆菌碳源的需要，又能维持培养液的pH，培养24h发酵液菌体温重为19．1g／L，以尿苷(UR)和5—氟尿嘧啶(FU)为底物，产气肠杆菌游离湿菌体对UR的酶转化率为56．7％；摇瓶培养基中加入3．0g/L胞苷诱导核苷磷酸化酶，静息细胞的酶转化率提高了10．2％；酶反应间隙流加底物UR浓度达30mmol/L时，产物FUR的浓度最高，进一步增加底物浓度则抑制产物的合成。结论：通过大规模培养可获得产高活力核苷磷酸化酶的产气肠杆菌，其静息细胞可用于抗肿瘤核苷药物中间体FUR的制备。