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NF-κB p50蛋白的原核表达及纯化
孙健
,
李萍
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王进科
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中国药科大学学报
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2005
>
36(3)
: 263-267.
孙健, 李萍, 王进科. NF-κB p50蛋白的原核表达及纯化[J]. 中国药科大学学报, 2005, 36(3): 263-267.
引用本文:
孙健, 李萍, 王进科. NF-κB p50蛋白的原核表达及纯化[J]. 中国药科大学学报, 2005, 36(3): 263-267.
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NF-κB p50蛋白的原核表达及纯化
孙健
1
,
李萍
1
,
王进科
2
1.
中国药科大学生药学教研室
2.
东南大学吴健雄实验室
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目的:提供p50研究所需大量纯蛋白。方法:将编码p50N端39376aa肽段的cDNA片段插入到pET32a(+)载体的BamHⅠ和NcoⅠ酶切位点之间,构建了p50蛋白原核表达载体(pET-p50),用IPTG诱导表达,His-Bind柱进行纯化。结果:原核表达载体(pET-p50)30℃,0.1mmol/LIPTG诱导5h,重组蛋白大量表达,经凝胶迁移滞后实验证明纯化的重组p50蛋白具有序列特异性DNA结合活性。结论:在优化条件下,通过His-Bind柱亲和层析法可以获得大量重组蛋白,并通过凝胶迁移滞后实验证明其具有较高的活性。
关键词:
p50蛋白
/
原核表达
/
纯化
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