摘要: 目的:为获得大量人源血管内皮生长因子突变体(hVEGF121′)的重组蛋白,本文研究了其发酵条件,分离纯化方法,并初步考察了其生物活性。方法:应用PCR介导的定点突变方法,将hVEGF121中对其活性影响较小的1~8位和115~121位两个肽段替换成破伤风毒素(TT)的两个强表位肽段618~627位和831~837位,构建高效表达的pET28a/hVEGF121′重组质粒,考察诱导条件对目的蛋白表达量的影响;所得包含体经过DEAE-Cellulose离子交换柱纯化;初步比较了VEGF121和突变体VEGF121′的免疫和抗肿瘤效果。结果:最佳表达条件为:乳糖诱导时间6 h,诱导浓度2 mmol/L;离子交换纯化后可得到电泳纯的突变体hVEGF121′;初步的动物免疫发现突变体VEGF121′和VEGF121有相近的免疫滴度,但前者抗肿瘤效果更显著。结论:经发酵纯化后得到重组人源血管内皮生长因子突变体(hVEGF121′)的纯品,并初步展现良好的抗肿瘤效果。